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何氏育麟方通过调控线粒体分裂-融合改善POI小鼠卵巢功能 |
He Shi Yu Lin Formula Improves Ovarian Function of POI Mice by Regulating Mitochondrial fission and fusion |
投稿时间:2024-02-05 修订日期:2024-04-14 |
DOI: |
中文关键词: 何氏育麟方 早发性卵巢功能不全 线粒体分裂-融合蛋白 活性氧 |
英文关键词:He Shi Yu Lin Formula Early onset ovarian insufficiency Mitochondrial fission and fusion protein Reactive oxygen species |
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中文摘要: |
目的:探究何氏育麟方改善早发性卵巢功能不全模型小鼠卵巢功能的作用机制。方法:SPF级雌性育龄期小鼠50只,随机分为正常组、模型空白组、阳性对照组、中药低剂量组、中药高剂量组,各10只。环磷酰胺连续腹腔注射2周建立卵巢功能不全小鼠模型。正常 组及模型空白组给予蒸馏水灌胃,阳性对照组给予辅酶Q10溶液灌胃,中药低剂量组和高剂量组分别给予33 g/kg、66 g/kg何氏育麟方中药灌胃。给药六周后,测定小鼠血清AMH水平。电镜下观察小鼠卵母细胞中线粒体的形态;MitoSOX测定卵母细胞氧化应激活性氧水平;JC-1染色共聚焦显微镜观察卵母细胞中线粒体的膜电位。通过蛋白免疫印记Western blot 法检测线粒体融合蛋白1(Mfn1)、线粒体融合蛋白2(Mfn2)、线粒体动力蛋白相关蛋白1(Drp1)、线粒体分裂蛋白1(Fis1 )在小鼠卵巢组织中的表达水平。结论: 与正常组比较,模型空白组AMH[(2204.34±250.49)pg/mL比(3024.48 ±325.18)pg/mL, P<0.01]、膜电位[(0.493±0.025)△Ψm比(2.737±0.338)△Ψm,P<0.01]、Mfn1蛋白表达水平[(0.307±0.076)比(1.000±0.194),P<0.01]、Mfn2蛋白表达水平[(0.179±0.056)比(1.000±0.149),P<0.01]水平降低,2',7'-二氯荧光素(DCF)荧光强度[(63.250±5.855)比(16.206±1.863),P<0.01]、Drp1蛋白表达水平[(9.266±0.096)比(1.000±0.278),P<0.01]、Fis1蛋白表达水平[(2.437±0.153)比(1.000±0.167),P<0.01]升高。与模型空白组比较,阳性对照组、中药低剂量组、中药高剂量组AMH[(2712.50±226.33)pg/mL、(2657.63±354.82)pg/mL比(2204.34±250.49)pg/mL,P<0.05或P<0.01]、膜电位膜电位[(1.534±0.114)△Ψm、(1.058±0.059)△Ψm、(1.770±0.115)△Ψm比(0.493±0.025)△Ψm,P<0.05或P<0.01]、Mfn1蛋白表达水平[(0.870±0.163)、(0.738±0.109)、(0.902±0.122)比(0.307±0.076),P<0.05或P<0.01]、Mfn2蛋白表达水平[(0.769±0.116)、(0.557±0.079)、(0.802±0.094)比(0.179±0.056),P<0.01]升高,DCF荧光强度[(32.851±2.871)、(53.561±2.538)、(26.371±1.742)比(63.250±5.855),P<0.05或P<0.01]、Drp1蛋白表达水平[(4.455±1.205)、(6.966±1.016)、(2.192±1.028)比(9.266±0.096),P<0.05或P<0.01]、Fis1蛋白表达水平[(1.737±0.163)、(1.974±0.173)、(1.357±0.111)比(2.437±0.153),P<0.05或P<0.01]降低。电镜下观察卵巢线粒体形态,阳性对照组和中药低、高剂量组均不同程度改善线粒体形态、数量及分布情况。结果:何氏育麟方通过影响早发性卵巢功能不全模型小鼠卵母细胞线粒体分裂-融合蛋白表达,改变线粒体结构和功能,降低卵巢活性氧水平,进而改善卵巢功能。 |
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