| 严双凤,徐志波.穗花杉双黄酮调控miR-140-5p介导脂多糖致急性肺损伤的机制研究[J].浙江中西医结合杂志,2020,30(7): |
| 穗花杉双黄酮调控miR-140-5p介导脂多糖致急性肺损伤的机制研究 |
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| 投稿时间：2020-03-11 修订日期：2020-05-29 |
| DOI： |
| 中文关键词: 急性肺损伤 中药单体 炎症因子 炎症 microRNA |
| 英文关键词: |
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| 中文摘要: |
| 目的 探究穗花杉双黄酮对脂多糖（lipopolysaccharides ，LPS）致大鼠急性肺损伤（acute lung injury ，ALI）的保护作用及机制研究。方法 将60只大鼠随机分为4组：对照组、模型组、阳性对照组、实验组。模型组、阳性对照组和实验组大鼠均通过气道滴注3.00 mg/kg LPS 100μl，空白对照组气道滴注等体积的生理盐水，6 h后阳性对照组大鼠腹腔注射地塞米松（2.5 mg/kg），实验组大鼠腹腔注射穗花杉双黄酮（2.5 mg/kg），对照组和模型组注射等体积生理盐水。48 h后称重测定大鼠肺组织湿/干比；苏木精-伊红染色( hematoxylin-Eosin staining，HE )观察各组大鼠肺组织病理结构；ELISA法检测大鼠血清中肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor alpha，TNF-α）、白细胞介素-6（interleukin 6，IL-6）和白细胞介素-1β（interleukin-1β，IL-1β）水平；RT-PCR检测miR-140-5p在肺组织中的表达情况；蛋白印迹法（western Blot，WB）检测肺组织中Toll样受体4（Toll Like Receptor 4,TLR4）、核因子活化B细胞κ轻链增强子（nuclear factor kappa-light-chain-enhancer of activated B cells，NF-κB）蛋白表达水平。RT-PCR检测肺组织中miR-140-5p的表达情况。利用LPS刺激肺上皮细胞A549，加入穗花杉双黄酮RT-PCR检测miR-140-5P的表达，利用LPS刺激肺上皮细胞A549,加入miR-140-5P抑制剂、mimic-NC干预，RT-PCR检测TLR4、NF-κB的表达。结果 实验组肺组织湿/干比明显低于模型组（P＜0.05）；HE染色结果显示实验组大鼠肺组织结构相比于ALI模型组大鼠炎症细胞明显减少，肺泡间隔明显减轻；ELISA结果显示实验组大鼠肺组织中TNF-α、IL-6和IL-1β水平均明显低于模型组（P＜0.05）；WB结果发现实验组大鼠肺组织中TLR4、NF-κB表达量明显低于模型组；RT-PCR结果显示实验组大鼠肺组织和细胞中miR-140-5P表达均明显高于模型组（P＜0.05），而miR-140-5P mimic能明显抑制TLR4、NF-κB的表达（P＜0.05）。结论 穗花杉双黄酮能明显缓解LPS诱导的大鼠ALI，降低肺损伤病理进程中血清TNF-α、IL-6和IL-1β的含量，对ALI起保护作用，其作用机制可能是通过促进了miR-140-5P的表达，从而减低ALI炎症过程中关键炎症信号TLR4、NF-κB的表达。 |
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